Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Datos CRISPR no: la imagen ilustra la calidad de los anticuerpos para visualizar los resultados de los experimentos CRISPR.
Myc Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421770
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Myc El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Myc, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Myc Anticuerpo (9E10): sc-40
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Myc Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421770 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Myc codifica el factor de transcripción MYC, un regulador central del crecimiento celular, la acumulación de biomasa y la progresión del ciclo celular en células de ratón. MYC se une a elementos E-box para controlar amplios programas de expresión génica que coordinan la biogénesis ribosomal, el metabolismo de nucleótidos y aminoácidos y la función mitocondrial, a la vez que integra señales de vías como MAPK/ERK, PI3K–AKT–mTOR y WNT/β-catenina. Un control estricto de Myc es necesario para el desarrollo normal y la homeostasis tisular, y su desregulación está fuertemente vinculada a la transformación oncogénica y a estados de diferenciación alterados. Dado que MYC influye en la apoptosis, las respuestas al estrés de replicación del ADN y la accesibilidad de la cromatina, se estudia ampliamente en biología del cáncer, programas de células madre y remodelación metabólica.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Myc (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Myc en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Myc junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Myc tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Myc.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Myc para la investigación de la señalización de Myc, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Myc críticos para la función de Myc
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Myc para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Myc CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Myc CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Myc. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Myc (m) y el plásmido HDR Myc (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Myc para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Myc definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.