Plásmido Doble Nickase (h) MRP7: sc-406412-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MRP7 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MRP7 (h) y el plásmido de doble nickasa MRP7 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a ABCC10. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MRP7 | sc-406412-NIC | 20 µg | $410.00 |
ABCC10 codifica el transportador humano de la superfamilia ABC MRP7 (ABCC10), una bomba de eflujo de la membrana plasmática que utiliza la hidrólisis de ATP para exportar una amplia gama de xenobióticos y metabolitos endógenos. La actividad de MRP7 contribuye a la desintoxicación celular e influye en la disposición intracelular de fármacos, conectándose con vías que regulan el transporte de membrana, el manejo de lípidos y las respuestas al estrés celular. La expresión o función desregulada de ABCC10/MRP7 se ha relacionado con fenotipos alterados de quimiorresistencia en modelos de cáncer y con variaciones en rasgos farmacocinéticos, lo que lo hace relevante para estudios de biología de transportadores e interacciones fármaco–transportador. Como miembro de la subfamilia ABCC, MRP7 también proporciona un sistema manejable para dilucidar cómo los transportadores ABC modulan funciones de barrera y la distribución tisular de moléculas pequeñas.
MRP7 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ABCC10 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ABCC10. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ABCC10. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ABCC10 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.