Plasmide Double Nickase (m) MMP2: sc-421674-NIC
- Espèces cibles: mouse
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (m) MMP2 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MMP2 Double Nickase (m) et le plasmide MMP2 Double Nickase (m2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant Mmp2. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: MMP2 Antibody (2C1): sc-13594
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (m) MMP2 | sc-421674-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (m2) MMP2 | sc-421674-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le gène murin **Mmp2** code la métalloprotéinase matricielle-2 (MMP2), une endopeptidase sécrétée, dépendante du zinc, qui dégrade la membrane basale et des composants de la matrice extracellulaire interstitielle tels que le collagène de type IV et la gélatine. L’activité de MMP2 est régulée via sa sécrétion sous forme de zymogène puis son activation à la surface cellulaire en coordination avec MT1-MMP (MMP14) et TIMP2, ce qui l’associe à la protéolyse péricellulaire, à la migration cellulaire et au remodelage tissulaire. Par le renouvellement de la matrice extracellulaire, MMP2 interfère avec la signalisation des intégrines, les programmes de transition épithélio-mésenchymateuse et les voies de remodelage inflammatoire. Une dérégulation de MMP2 a été associée au remodelage fibrotique, à des altérations de la matrice vasculaire et cardiaque, ainsi qu’à des phénotypes invasifs dans des modèles oncologiques, ce qui en fait une cible fréquente pour des études mécanistiques chez la souris.
MMP2 Le plasmide double nickase (m) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus Mmp2 dans les lignées cellulaires mouse. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de Mmp2. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de Mmp2. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de Mmp2.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.