Plasmide Double Nickase (h) MLL3: sc-402052-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) MLL3 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide MLL3 Double Nickase (h) et le plasmide MLL3 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant KMT2C. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) MLL3 | sc-402052-NIC | 20 µg | $410.00 |
KMT2C (MLL3) code une histone méthyltransférase contenant un domaine SET, qui catalyse principalement la mono‑méthylation de H3K4 au niveau des enhancers, modulant l’accessibilité de la chromatine et des programmes transcriptionnels spécifiques du contexte. En tant que composant central de complexes régulateurs de type COMPASS, MLL3 coordonne la communication enhancer–promoteur et intègre, au cours du développement et de la différenciation, les signaux émis par des facteurs de transcription déterminant la lignée cellulaire. La perturbation de KMT2C altère l’architecture des enhancers et l’homéostasie transcriptionnelle, affectant des voies liées à la réponse aux dommages de l’ADN, au contrôle du cycle cellulaire et aux décisions de destinée cellulaire. Des altérations de KMT2C sont récurrentes dans de nombreux types de cancers et dans des troubles du neurodéveloppement, faisant de MLL3 un nœud clé pour l’étude de la dérégulation épigénétique.
MLL3 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus KMT2C dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de KMT2C. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de KMT2C. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de KMT2C.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.