Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) MCM6: sc-402146-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MCM6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MCM6 (h) y el plásmido de doble nickasa MCM6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MCM6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: MCM6 Anticuerpo (H-8): sc-393618
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MCM6 | sc-402146-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) MCM6 | sc-402146-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
MCM6 codifica una subunidad central del complejo helicasa MCM2–7, que licencia los orígenes de replicación del ADN y promueve la progresión de la horquilla de replicación durante la fase S. Mediante su carga regulada sobre la cromatina junto con ORC, CDC6 y CDT1, MCM6 contribuye a la duplicación del genoma, a las respuestas al estrés replicativo y a la coordinación con vías de control (checkpoints) como ATR/CHK1. La expresión o actividad desregulada de MCM6 se utiliza con frecuencia como marcador de capacidad proliferativa y se ha asociado con fenotipos de inestabilidad genómica observados en diversos cánceres y otros estados hiperproliferativos. La perturbación de MCM6 ofrece una vía directa para estudiar el licenciamiento de orígenes, la estabilidad de la horquilla y el control del ciclo celular en células humanas.
MCM6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MCM6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MCM6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MCM6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MCM6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.