Plásmido Doble Nickase (h) MBD6: sc-414039-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)MBD6 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MBD6 (h) y el plásmido de doble nickasa MBD6 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a MBD6. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) MBD6 | sc-414039-NIC | 20 µg | $410.00 |
La proteína 6 del dominio de unión a metil-CpG (MBD6) es un factor asociado a la cromatina que reconoce características de la metilación del ADN y ayuda a interpretar las marcas epigenéticas para configurar programas transcripcionales. En células humanas, MBD6 se asocia con la regulación de la expresión génica mediante la remodelación de la cromatina y el mantenimiento de estados de cromatina represivos, lo que influye en procesos como la identidad celular y la diferenciación. Dado que el control de la cromatina dependiente de la metilación se altera con frecuencia en el cáncer y en fenotipos del neurodesarrollo, la perturbación de MBD6 ofrece una vía para investigar cómo los lectores epigenéticos modulan las redes transcripcionales en contextos normales y relevantes para la enfermedad. Los estudios funcionales de MBD6 pueden aclarar la interacción entre la metilación del ADN, las modificaciones de histonas y las vías de estabilidad del genoma.
MBD6 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus MBD6 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de MBD6. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de MBD6. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con MBD6 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.