Plásmido Doble Nickase (m) MAML2: sc-435408-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)MAML2 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa MAML2 (m) y el plásmido de doble nickasa MAML2 (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Maml2. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) MAML2 | sc-435408-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (m2) MAML2 | sc-435408-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Mouse Maml2 codifica mastermind-like 2 (MAML2), un coactivador transcripcional que se asocia con complejos NICD–CSL/RBPJ para impulsar programas de expresión génica dependientes de Notch que controlan decisiones de destino celular, diferenciación y homeostasis tisular. MAML2 integra señales en los promotores diana para modular las salidas transcripcionales que influyen en la proliferación y la especificación de linaje en múltiples contextos. La actividad transcripcional Notch–MAML desregulada se ha vinculado con anomalías del desarrollo y con la reprogramación transcripcional asociada al cáncer, lo que convierte a MAML2 en un nodo útil para interrogar la vía tanto in vivo como in vitro. En sistemas murinos, la manipulación de Maml2 permite estudios mecanísticos de la regulación transcripcional por Notch, la epistasis con otros componentes de la vía y los efectos en redes génicas aguas abajo.
MAML2 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Maml2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Maml2. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Maml2. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Maml2 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.