Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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LZIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406526
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- LZIP El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico LZIP, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: LZIP Anticuerpo (Q-61): sc-100994
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
LZIP Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-406526 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
CREB3 codifica LZIP, un factor de transcripción básico tipo “cremallera de leucina” (bZIP) que se localiza en el retículo endoplásmico y puede activarse mediante proteólisis intramembrana regulada para modular la expresión génica. LZIP participa en programas de adaptación al estrés celular, integrando el estrés del RE y la señalización de la respuesta a proteínas mal plegadas (UPR) con el control transcripcional de la capacidad de la vía secretora y de la homeostasis metabólica. A través de interacciones con otros factores bZIP y elementos promotores, influye en rutas vinculadas a la inflamación, la diferenciación y el metabolismo de lípidos y glucosa. En la literatura, la actividad desregulada de CREB3/LZIP se ha asociado con alteraciones en la señalización de estrés y con la reprogramación transcripcional observada en múltiples contextos de enfermedad, lo que respalda su relevancia para estudios mecanísticos.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO LZIP (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen CREB3 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del CREB3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de CREB3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LZIP.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en CREB3 para la investigación de la señalización de LZIP, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de CREB3 críticos para la función de LZIP
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de CREB3 para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido LZIP CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido LZIP CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus CREB3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LZIP (h) y el plásmido HDR LZIP (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología CREB3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana CREB3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.