LRRN3 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421473

Descripción general

Lrrn3 codifica la proteína neuronal 3 con repeticiones ricas en leucina (LRRN3), una proteína transmembrana de tipo I enriquecida en tejidos neurales e implicada en el reconocimiento célula–célula, la extensión de neuritas y la señalización asociada a sinapsis. A través de sus dominios extracelulares LRR, se cree que LRRN3 contribuye a procesos similares a la adhesión y a la coordinación de programas de diferenciación neuronal, influyendo en la formación de redes y la plasticidad. Los patrones de expresión también vinculan a LRRN3 con estados de células inmunes, donde se utiliza como marcador de maduración de células T y de agotamiento funcional, lo que sugiere funciones en la remodelación transcripcional asociada a la activación. Se ha informado de una expresión desregulada de Lrrn3 en contextos neurodel desarrollo y cercanos a la neurodegeneración, así como en conjuntos de datos de inmuno-oncología, lo que respalda su uso en estudios mecanísticos de señalización neural e inmune.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO LRRN3 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Lrrn3 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Lrrn3 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Lrrn3 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína LRRN3.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Lrrn3 para la investigación de la señalización de LRRN3, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Lrrn3 críticos para la función de LRRN3
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Lrrn3 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido LRRN3 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido LRRN3 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Lrrn3. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR LRRN3 (m) y el plásmido HDR LRRN3 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Lrrn3 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Lrrn3 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.