LONP2 Plasmide Double Nickase (h): sc-413504-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- LONP2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il LONP2 Double Nickase Plasmid (h) e il LONP2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira LONP2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
LONP2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-413504-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
LONP2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-413504-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
LONP2 codifica una proteasi perossisomiale della famiglia Lon, AAA+ e ATP-dipendente, che contribuisce al controllo di qualità dei perossisomi riconoscendo, svolgendo e degradando proteine della matrice danneggiate o ripiegate in modo errato. Mantenendo la proteostasi perossisomiale, LONP2 supporta processi metabolici lipidici, tra cui la β-ossidazione degli acidi grassi e la gestione delle specie reattive dell’ossigeno, che si intrecciano con risposte più ampie allo stress cellulare. Alterazioni della funzione perossisomiale e squilibri ossidativi sono implicati in fenotipi metabolici e neurodegenerativi, rendendo LONP2 un nodo utile per studiare i percorsi che collegano la manutenzione degli organelli all’omeostasi cellulare. LONP2 umano è quindi rilevante per ricerche sul metabolismo associato ai perossisomi, sul turnover proteico e sull’adattamento allo stress.
LONP2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus LONP2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di LONP2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di LONP2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con LONP2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.