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Latrophilin-2慢病毒激活颗粒(h) | sc-403945-LAC | 200 µl | $455.00 |
ADGRL2 编码 latrophilin-2,这是一种黏附型 GPCR,具有较大的细胞外结构域,可介导细胞—细胞相互作用,并将细胞外信号转导为细胞内信号。Latrophilin-2 参与接触依赖性的细胞间通讯,可与异源三聚体 G 蛋白偶联,影响 cAMP 与 Ca²⁺ 相关信号传导、细胞骨架重塑以及与突触相关的过程。通过与突触黏附伙伴和细胞外基质成分相互作用,它能够调控神经元连接性与神经回路的组装。黏附型 GPCR 信号失调以及突触组织结构改变已被认为与神经发育和神经精神相关表型有关,因此 ADGRL2 可作为研究信号传导机制与神经连接性的一个重要靶点。
Latrophilin-2 慢病毒激活颗粒(h)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 ADGRL2 表达。
Latrophilin-2 慢病毒激活颗粒(h)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在ADGRL2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性Latrophilin-2表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 ADGRL2 基因组位点和调控架构。
慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。
仅供研究使用。不用于诊断或治疗。