Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KCNQ4 (h): sc-403090
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- KCNQ4 Le plasmide CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) est un ensemble de plasmides, chacun codant pour la nucléase Cas9 et un ARN guide (gRNA) de 20 nt spécifique à la cible, conçu pour une efficacité de knockout maximale à l'aide de séquences issues de la bibliothèque GeCKO v2
- Les séquences d'ARN guide (gRNA) dirigent Cas9 pour induire des cassures double brin (DSB) spécifiques au site dans le locus génomique KCNQ4, entraînant un knock-out génique par jonction non homologue (NHEJ)
- Les gènes de résistance à la puromycine et RFP sont flanqués de sites LoxP, permettant la suppression des marqueurs de sélection via la recombinase Cre (Cre Vector : sc-418923) après l'établissement de lignées cellulaires knock-out stables
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: KCNQ4 Antibody (F-10): sc-271320
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide CRISPR/Cas9 KO KCNQ4 (h) | sc-403090 | 20 µg | $397.00 |
Présentation
KCNQ4 code une sous-unité de canal potassique voltage‑dépendant (Kv7.4) qui contribue au courant M et stabilise le potentiel de membrane en régulant l’efflux de K⁺ dans les cellules excitables. L’activité du canal module la génération des potentiels d’action, l’excitabilité cellulaire et la signalisation dépendante du calcium via le contrôle du potentiel de repos et des dynamiques de repolarisation. KCNQ4 est étroitement lié à la physiologie auditive : une altération de la fonction du canal perturbe l’homéostasie ionique et l’excitabilité des cellules ciliées cochléaires ainsi que des circuits associés. Des variations génétiques ou une dysrégulation de KCNQ4 ont été associées à des déficiences auditives héréditaires, ce qui en fait une cible pertinente pour des études mécanistiques de la transduction sensorielle et des voies de signalisation neuronales.
Le plasmide CRISPR/Cas9 KO KCNQ4 (h) est un ensemble de plasmides conçus pour la disruption ciblée du gène KCNQ4 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide co-exprime un ARN guide unique (sgRNA) ciblant un site distinct au sein du KCNQ4, ainsi que la nucléase Cas9 de Streptococcus pyogenes. Les plasmides codent également pour la GFP, ce qui permet l'identification par fluorescence et l'enrichissement des cellules transfectées avec succès par microscopie à fluorescence ou cytométrie en flux.
La conception multi-guide augmente la probabilité de générer des insertions ou des délétions (indels) qui perturbent le cadre de lecture ouvert KCNQ4 à la suite de la formation de cassures double brin médiées par Cas9. Les cassures d'ADN introduites par le système CRISPR/Cas9 sont réparées par des voies endogènes de jonction non homologue (NHEJ), ce qui entraîne fréquemment des mutations par décalage du cadre de lecture qui suppriment l'expression de la protéine KCNQ4.
Ce système de knock-out CRISPR permet la génération efficace de modèles cellulaires déficients en KCNQ4 pour l'étude de la signalisation de KCNQ4, les études de génomique fonctionnelle, la recherche en biologie du cancer et l'évaluation des réponses thérapeutiques dans des lignées cellulaires humaines.
Caractéristiques principales
- sgRNA ciblant le ou les exons de KCNQ4 essentiels à la fonction de KCNQ4
Co-expression de SpCas9 et de sgRNA à partir d'un seul plasmide pour une administration simplifiée
Rapporteur GFP pour l'identification des cellules transfectées
Pool de plasmides ciblant plusieurs sites génomiques de KCNQ4 pour améliorer l'efficacité du knock-out
Compatible avec l'administration par transfection
Variantes de conception
CRISPR +/- HDR
- Les gRNA codés par le KCNQ4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h) et le KCNQ4 plasmide CRISPR/Cas9 KO (h2) ciblent des sites distincts au sein du locus KCNQ4. Une ou les deux conceptions de ciblage peuvent être disponibles. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Les constructions donneuses HDR codées par le KCNQ4 plasmide HDR (h) et le KCNQ4 (h2) contiennent une cassette de résistance à la puromycine et un rapporteur RFP flanqué de bras d'homologie KCNQ4 pour permettre la réparation dirigée par homologie au niveau de sites cibles KCNQ4 définis correspondant aux conceptions CRISPR/Cas9 KO. La disponibilité des donneurs HDR peut varier. Voir les produits associés pour connaître la disponibilité.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.