JAK2 Plasmide Double Nickase (h): sc-400246-NIC
- Specie Target: human
- 20 µg di DNA plasmidico purificato, pronto per trasfezione; sufficiente fino a 20 trasfezioni
- JAK2 Plasmide Double Nickase (h) consiste in un paio di plasmidi ciascuno codificante una nucleasi Cas9 mutata D10A ed un RNA guida (gRNA) di 20 nt target specifico, disegnato per il silenziamento dell'espressione genica con una maggiore specificità rispetto alla controparte CRISPR/Cas9 KO
- Le sequenze di gRNA appaiate sono offset di circa 20 bp per permettere lo specifico doppio nicking Cas9 mediato che mima un DSB
- Un plasmide dei due contiene un gene per la resistenza alla puromicina per la selezione; l'altro plasmide nella coppia contiene un marker GFP per confermare la trasfezione visivamente.
- Il JAK2 Double Nickase Plasmid (h) e il JAK2 Double Nickase Plasmid (h2) codificano per distinti design di gRNA accoppiati che prendono di mira JAK2. Uno o entrambi i design potrebbero essere disponibili
- In seguito alla trasfezione, l'efficienza dll'attivazione genica può essere testata con WB, IF o IHC utilizzando l'anticorpo: JAK2 Antibody (C-10): sc-390539
Informazioni ordini
| Nome del prodotto | Codice del prodotto | UNITÀ | Prezzo | Quantità | Preferiti | |
JAK2 Plasmide Double Nickase (h) | sc-400246-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
JAK2 Plasmide Double Nickase (h2) | sc-400246-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Il gene umano **JAK2** codifica una tirosin-chinasi non recettoriale che accoppia i recettori per citochine e fattori di crescita alla segnalazione intracellulare, in particolare attraverso la via **JAK–STAT**. In seguito all’attivazione del recettore, JAK2 media cascate di fosforilazione che influenzano programmi trascrizionali alla base dell’ematopoiesi, della differenziazione delle cellule immunitarie e delle risposte infiammatorie, con ulteriore crosstalk con le vie **PI3K–AKT** e **MAPK**. Un’attività o un’espressione deregolata di JAK2 è stata associata a una sensibilità alterata alle citochine e a una segnalazione proliferativa aberrante nella biologia delle malattie ematologiche e infiammatorie. In quanto nodo centrale della segnalazione prossimale al recettore, JAK2 è ampiamente studiato per il suo ruolo nella determinazione del destino di linea, nella segnalazione da stress e nel controllo trascrizionale a valle dei recettori per citochine.
JAK2 Il plasmide Double Nickase (h) consiste in una coppia di plasmidi ingegnerizzati per l'editing ad alta specificità del locus JAK2 nelle linee cellulari human. Ciascun plasmide esprime una nickasi Cas9 D10A e un sgRNA distinto che prende di mira filamenti di DNA opposti all'interno di JAK2. Quando indirizzate verso siti adiacenti su filamenti di DNA opposti, le due nickasi generano tagli a filamento singolo sfalsati che insieme producono una rottura a doppio filamento sfalsata, richiedendo un'attività coordinata sul bersaglio da entrambe le guide. La rottura del DNA risultante viene risolta da vie di riparazione cellulare endogene, più comunemente attraverso la giunzione non omologa delle estremità (NHEJ), portando a inserzioni o delezioni che interrompono la funzione di JAK2. Richiedendo il coinvolgimento di due sgRNA nel locus bersaglio, l'approccio a doppia nickasi migliora la specificità dell'editing e fornisce una strategia CRISPR complementare per applicazioni in cui è desiderato un controllo aggiuntivo sulla precisione del targeting.
Per supportare l'identificazione efficiente delle cellule modificate, un plasmide codifica la GFP per la visualizzazione fluorescente delle popolazioni trasfettate, mentre il plasmide di accompagnamento porta un gene di resistenza alla puromicina per la selezione antibiotica. Insieme, queste caratteristiche supportano l'arricchimento efficiente delle popolazioni co-trasfettate e semplificano la convalida dei cloni con JAK2 interrotto.
Solo per uso di ricerca. Non destinato a uso diagnostico o terapeutico.