Integrin β5/ITGB5 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421177

Descripción general

Itgb5 codifica la integrina β5, un receptor transmembrana de adhesión que se asocia principalmente con la integrina αV para formar αVβ5, lo que permite la unión celular a ligandos de la matriz extracelular como la vitronectina. Mediante el ensamblaje de adhesiones focales y la señalización bidireccional, αVβ5 modula la remodelación del citoesqueleto y activa vías como FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK/ERK, que coordinan la migración, la supervivencia y la proliferación. ITGB5 también contribuye a procesos de endocitosis y mecanotransducción que influyen en la remodelación tisular, las respuestas angiogénicas y la dinámica epitelio‑mesénquima. La desregulación de la señalización de integrinas y los programas de adhesión dependientes de β5 alterados se han implicado en modelos de fibrosis, progresión tumoral y remodelación de microambientes inflamatorios, lo que respalda su utilidad en estudios mecanísticos de fenotipos impulsados por la adhesión.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin β5/ITGB5 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Itgb5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Itgb5 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Itgb5 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin β5/ITGB5.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Itgb5 para la investigación de la señalización de Integrin β5/ITGB5, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Itgb5 críticos para la función de Integrin β5/ITGB5
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Itgb5 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin β5/ITGB5 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Integrin β5/ITGB5 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Itgb5. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin β5/ITGB5 (m) y el plásmido HDR Integrin β5/ITGB5 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Itgb5 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Itgb5 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.