Integrin α4/ITGA4/CD49d Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421162

Descripción general

Itga4 codifica la integrina α4 (ITGA4/CD49d), una subunidad α que se asocia con β1 o β7 para formar las integrinas α4β1 (VLA-4) y α4β7, mediadores centrales de la adhesión célula–célula y célula–matriz. Estos receptores se unen a ligandos como VCAM1 y la fibronectina, coordinando el tráfico de leucocitos, la adhesión firme y la migración transendotelial durante la vigilancia inmunitaria y la inflamación. La señalización de ITGA4 se integra con las vías de adhesión focal y de remodelación del citoesqueleto para influir en programas de migración, supervivencia y activación, y contribuye al posicionamiento de células hematopoyéticas y linfoides dentro de los tejidos. La actividad desregulada de la integrina α4 se estudia ampliamente en la patobiología inflamatoria y autoinmunitaria, así como en las interacciones tumor–estroma que favorecen la invasión y la diseminación metastásica.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Integrin α4/ITGA4/CD49d (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Itga4 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Itga4 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Itga4 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Integrin α4/ITGA4/CD49d.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Itga4 para la investigación de la señalización de Integrin α4/ITGA4/CD49d, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Itga4 críticos para la función de Integrin α4/ITGA4/CD49d
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Itga4 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Integrin α4/ITGA4/CD49d CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Itga4. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Integrin α4/ITGA4/CD49d (m) y el plásmido HDR Integrin α4/ITGA4/CD49d (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Itga4 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Itga4 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.