Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α1/ITGA1/CD49a: sc-430957-NIC
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (m)Integrin α1/ITGA1/CD49a consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa Integrin α1/ITGA1/CD49a (m) y el plásmido de doble nickasa Integrin α1/ITGA1/CD49a (m2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a Itga1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Integrin α1/ITGA1/CD49a Anticuerpo (A-9): sc-271034
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (m) Integrin α1/ITGA1/CD49a | sc-430957-NIC | 20 µg | $410.00 |
Itga1 codifica la integrina α1 (ITGA1/CD49a), una subunidad α que se asocia con β1 para formar el receptor de colágeno/laminina α1β1, conectando la interacción con la matriz extracelular con la señalización intracelular y la remodelación del citoesqueleto. La adhesión mediada por ITGA1 regula la migración celular, la supervivencia y la mecanotransducción a través de complejos de adhesión focal y vías downstream como FAK/Src, MAPK/ERK y PI3K/AKT, además de influir en la organización tisular y en las interacciones entre células inflamatorias y matriz. En modelos murinos, la alteración de la función de Itga1 se ha asociado con un tráfico leucocitario desregulado, remodelación de la matriz relacionada con la fibrosis y cambios dependientes del contexto en la invasión de células tumorales y la biología del estroma. Estas funciones hacen de ITGA1 una diana útil para estudiar la detección de la matriz extracelular, la retención de células inmunitarias y la señalización impulsada por colágeno en el desarrollo y en microambientes relevantes para la enfermedad.
Integrin α1/ITGA1/CD49a El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Itga1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Itga1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Itga1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Itga1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.