Plásmido Doble Nickase (h) Integrin α1/ITGA1/CD49a: sc-401275-NIC

ITGA1 codifica la integrina α1 (CD49a), que se heterodimeriza con la integrina β1 para formar el receptor de colágeno/laminina α1β1, el cual media la adhesión célula–matriz extracelular y la señalización bidireccional. A través de su acoplamiento a complejos de adhesión focal y a vías que incluyen FAK/Src, PI3K–AKT y MAPK, ITGA1 influye en la remodelación del citoesqueleto, la migración, la supervivencia y la mecanotransducción. CD49a se expresa en múltiples compartimentos tisulares y subpoblaciones inmunitarias, apoyando procesos como la residencia tisular, la adhesión a membranas basales y la diferenciación dependiente de la matriz. La señalización desregulada de ITGA1 y las interacciones alteradas célula–matriz se han asociado con fibrosis, inflamación e invasión y metástasis de células tumorales, lo que la convierte en un nodo útil para estudiar fenotipos impulsados por la adhesión.

Integrin α1/ITGA1/CD49a El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus ITGA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de ITGA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de ITGA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con ITGA1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.