Inhibin β-B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421131
- Especies Diana: mouse
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- Inhibin β-B El plásmido CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) es un conjunto de plásmidos, cada uno de los cuales codifica la nucleasa Cas9 y un ARN guía (gRNA) de 20 nt específico para el objetivo, diseñado para lograr la máxima eficiencia de knockout utilizando secuencias derivadas de la biblioteca GeCKO v2
- Las secuencias de gRNA dirigen a Cas9 para que induzca roturas de doble cadena (DSB) específicas en el locus genómico Inhibin β-B, lo que da lugar a la inactivación del gen mediante unión de extremos no homólogos (NHEJ)
- Los genes de resistencia a la puromicina y RFP están flanqueados por sitios LoxP, lo que permite la eliminación de los marcadores de selección mediante la recombinasa Cre (Vector Cre: sc-418923) tras el establecimiento de líneas celulares knockout estables
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: Inhibin β-B Anticuerpo (H-8): sc-376971
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Inhibin β-B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-421131 | 20 µg | $397.00 |
Descripción general
Inhbb codifica la inhibina beta-B, una subunidad de la superfamilia TGF-β que forma homodímeros de activina B o heterodímeros de activina AB con INHBA, modulando la transcripción dependiente de SMAD2/3. La señalización por activina regula el desarrollo gonadal, la foliculogénesis, la función de las células de Sertoli y de la granulosa, y un control más amplio de la proliferación y diferenciación celular, así como de la remodelación de la matriz extracelular. En el ratón, la actividad alterada de Inhbb se ha vinculado a fenotipos reproductivos y a desregulación endocrina, y su vía se entrecruza con programas inflamatorios y fibróticos mediante un control dependiente del contexto de la expresión de citocinas y la remodelación tisular. Estas propiedades hacen de Inhbb un nodo útil para estudiar el cableado de la vía TGF-β/activina en biología del desarrollo y en estados celulares relevantes para la enfermedad.
El plásmido CRISPR/Cas9 KO Inhibin β-B (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Inhbb en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Inhbb junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.
El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Inhbb tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Inhibin β-B.
Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Inhbb para la investigación de la señalización de Inhibin β-B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.
Características principales
- sgRNA dirigidos a los exones de Inhbb críticos para la función de Inhibin β-B
Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Inhbb para mejorar la eficiencia del knockout
Compatible con la administración mediante transfección
Variantes de diseño
CRISPRs +/- HDRs
- Los gRNA codificados por el plásmido Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido Inhibin β-B CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Inhbb. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Inhibin β-B (m) y el plásmido HDR Inhibin β-B (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Inhbb para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Inhbb definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.