IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-424540
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- IL-27Rα O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico IL-27Rα, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-424540 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Il27ra codifica a cadeia alfa do receptor de interleucina-27 do camundongo (IL-27Rα, também conhecida como WSX-1), uma subunidade de receptor de citocina que se associa à gp130 para formar um complexo receptor funcional de IL-27. A sinalização via IL-27Rα ativa vias JAK/STAT, principalmente STAT1 e STAT3, para direcionar a diferenciação de células T, modular programas inflamatórios associados a Th1 e Th17 e influenciar a produção de citocinas em diversos tipos de células imunes. Por meio desses processos, o IL-27Rα contribui para a regulação da homeostase imunológica, de respostas induzidas por antígenos e do controle por retroalimentação da inflamação. A desregulação da sinalização IL-27/IL-27Rα tem sido implicada em modelos de patologia autoimune, inflamação crônica e disfunção imunológica induzida por infecções, sustentando seu uso como um nó mecanístico em pesquisas de imunologia.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO IL-27Rα (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Il27ra em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Il27ra, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Il27ra na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína IL-27Rα.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Il27ra para a investigação da sinalização de IL-27Rα, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Il27ra críticos para a função IL-27Rα
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Il27ra para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo IL-27Rα Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Il27ra. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo IL-27Rα Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR IL-27Rα (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Il27ra para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Il27ra definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.