Plásmido Doble Nickase (m) IGFBP5: sc-421066-NIC

El gen murino **Igfbp5** codifica la proteína de unión a factores de crecimiento similares a la insulina 5 (**IGFBP5**), un regulador secretado y asociado a la matriz extracelular (MEC) que modula la biodisponibilidad y la señalización de **IGF‑I/IGF‑II** a través de las vías **IGF1R–PI3K/AKT** y **MAPK**. Más allá del secuestro de IGF, IGFBP5 puede influir en la adhesión, la migración y la supervivencia celulares mediante interacciones con componentes de la MEC y actividades dependientes del contexto e independientes de IGF. La expresión de **Igfbp5** se asocia con procesos de remodelación tisular, como la miogénesis, la osteogénesis y la activación de fibroblastos, lo que la hace relevante para estudios de fibrosis, reparación de heridas y desarrollo esquelético. La desregulación de IGFBP5 se ha relacionado con programas alterados de proliferación y diferenciación en microambientes tumorales y con la remodelación del estroma, lo que respalda su uso como un nodo mecanístico en la investigación de la señalización por factores de crecimiento.

IGFBP5 El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Igfbp5 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Igfbp5. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Igfbp5. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Igfbp5 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.