IFRD2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (m): sc-421054

Descripción general

El regulador del desarrollo relacionado con interferón 2 (IFRD2) es un corregulador transcripcional implicado en el control de programas de expresión génica que configuran la diferenciación celular y las respuestas adaptativas al estrés. En sistemas murinos, IFRD2 se estudia por sus posibles funciones en la modulación de complejos transcripcionales asociados a la cromatina y en la coordinación de salidas de señalización dependientes del contexto que influyen en la proliferación y el compromiso de linaje. La regulación alterada de las proteínas de la familia IFRD se ha vinculado a procesos del desarrollo perturbados y a una señalización inflamatoria o de respuesta al estrés aberrante, lo que convierte a Ifrd2 en un locus útil para estudios mecanísticos de la homeostasis tisular. Dirigirse a Ifrd2 puede ayudar a aclarar cómo las dinámicas de represión/activación transcripcional se interconectan con vías posteriores que gobiernan el destino celular y la remodelación.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO IFRD2 (m) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen Ifrd2 en líneas celulares mouse. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del Ifrd2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de Ifrd2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína IFRD2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en Ifrd2 para la investigación de la señalización de IFRD2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de Ifrd2 críticos para la función de IFRD2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de Ifrd2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido IFRD2 CRISPR/Cas9 KO (m) y el plásmido IFRD2 CRISPR/Cas9 KO (m2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus Ifrd2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR IFRD2 (m) y el plásmido HDR IFRD2 (m2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología Ifrd2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana Ifrd2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.