HSPC144 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-412026

Visão geral

THYN1 (também conhecido como HSPC144) codifica uma proteína nuclear de timócitos implicada na regulação da apoptose e no controle do ciclo celular, com funções descritas na manutenção da homeostase celular durante a proliferação e o estresse. A proteína tem sido associada a processos nucleares que influenciam a sinalização de sobrevivência e pode interagir com vias que governam a morte celular programada, incluindo mecanismos dependentes de caspases. Alterações na expressão de THYN1 foram observadas em múltiplos contextos tumorais, sugerindo relevância para a transformação oncogênica e para a aptidão das células tumorais. Como resultado, THYN1 é frequentemente estudado em modelos de biologia hematopoética e de tecidos sólidos para esclarecer como a regulação da apoptose contribui para fenótipos associados a doenças.

O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HSPC144 (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene THYN1 em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do THYN1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.

O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do THYN1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HSPC144.

Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de THYN1 para a investigação da sinalização de HSPC144, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.

Características principais

• sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) THYN1 críticos para a função HSPC144
  Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
  Repórter GFP para identificação de células transfectadas
  Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos THYN1 para melhorar a eficiência do knockout
  Compatível com administração por transfecção

Variantes de Design

CRISPRs +/- HDRs

• Os gRNAs codificados pelo HSPC144 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo HSPC144 Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus THYN1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
  As construções doadoras HDR codificadas pelo HSPC144 Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR HSPC144 (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia THYN1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo THYN1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.

Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.