Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
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HRF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-423518
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- HRF O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico HRF, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:HRF Anticorpo (B-3): sc-133131
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
HRF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-423518 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O gene Tpt1 de camundongo codifica o fator de liberação de histamina (HRF), também conhecido como proteína tumoral controlada translacionalmente, uma proteína citosólica conservada implicada na regulação do crescimento celular, nas respostas ao estresse e na sinalização de sobrevivência. O HRF participa de vias ligadas à homeostase de cálcio, ao controle da apoptose e à modulação de funções inflamatórias e de células imunes, com papéis descritos na liberação de citocinas e em programas de ativação celular. Alterações na atividade de HRF/TPT1 têm sido associadas a inflamação e sinalização imune desreguladas, bem como a fenótipos proliferativos anormais relevantes para a oncologia e o remodelamento tecidual. Essas características tornam o Tpt1 um alvo útil para dissecar mecanismos de adaptação ao estresse, regulação imune e decisões de destino celular em sistemas de modelos murinos.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO HRF (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Tpt1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Tpt1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Tpt1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína HRF.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Tpt1 para a investigação da sinalização de HRF, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Tpt1 críticos para a função HRF
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Tpt1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo HRF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo HRF Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Tpt1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo HRF Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR HRF (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Tpt1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Tpt1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.