Plásmido Doble Nickase (h) HoxD13: sc-404471-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HoxD13 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HoxD13 (h) y el plásmido de doble nickasa HoxD13 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HOXD13. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HoxD13 | sc-404471-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HoxD13 | sc-404471-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HOXD13 codifica HoxD13, un factor de transcripción con homeobox que controla la identidad posicional y la formación de patrones durante el desarrollo embrionario, con funciones destacadas en la morfogénesis de las extremidades y de los apéndices distales. HoxD13 se une al ADN mediante su homeodominio conservado para coordinar redes reguladoras de genes que gobiernan la segmentación, la condrogénesis y los programas de diferenciación, integrándose con la regulación más amplia del clúster HOX y con señales morfogenéticas como SHH y WNT durante el patrón tisular. La alteración o desregulación de HOXD13 modifica los programas transcripcionales del desarrollo y se ha relacionado con malformaciones congénitas de las extremidades, incluida la sinpolidactilia, lo que lo convierte en un objetivo valioso para estudiar las relaciones genotipo‑fenotipo en biología del desarrollo humana.
HoxD13 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HOXD13 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HOXD13. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HOXD13. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HOXD13 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.