Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP A1: sc-400704-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)hnRNP A1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa hnRNP A1 (h) y el plásmido de doble nickasa hnRNP A1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HNRNPA1. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: hnRNP A1 Anticuerpo (4B10): sc-32301
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) hnRNP A1 | sc-400704-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) hnRNP A1 | sc-400704-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HNRNPA1 codifica la ribonucleoproteína nuclear heterogénea A1 (hnRNP A1), una proteína multifuncional de unión a ARN que se asocia con los pre-ARNm para regular el empalme alternativo, la exportación de ARNm y la traducción. hnRNP A1 participa en el ensamblaje del espliceosoma y en la definición de exones, y también contribuye al mantenimiento de los telómeros mediante interacciones con ARN que contiene repeticiones teloméricas y con factores de unión al ADN telomérico. Al coordinar el procesamiento y el metabolismo del ARN, hnRNP A1 influye en la dinámica de los gránulos de estrés y en programas más amplios de expresión génica vinculados al crecimiento y la diferenciación celulares. La desregulación de HNRNPA1 se ha implicado en la neurodegeneración y en alteraciones del procesamiento de ARN relevantes para el cáncer, lo que lo convierte en un objetivo útil para desentrañar redes de empalme de ARN y vías de proteostasis.
hnRNP A1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HNRNPA1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HNRNPA1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HNRNPA1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HNRNPA1 alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.