Plásmido Doble Nickase (h) HLX1: sc-403700-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)HLX1 consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa HLX1 (h) y el plásmido de doble nickasa HLX1 (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a HLX. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: HLX1 Anticuerpo (1B9): sc-293328
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) HLX1 | sc-403700-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) HLX1 | sc-403700-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
HLX (HLX1) codifica un factor de transcripción homeobox que regula decisiones sobre el destino celular y programas de diferenciación durante el desarrollo, con funciones destacadas en linajes hematopoyéticos e inmunitarios. Al unirse a motivos de ADN específicos de secuencia, HLX1 modula redes transcripcionales que controlan la proliferación, la supervivencia y el compromiso de linaje, integrándose con vías que modelan las respuestas a citocinas y la configuración del patrón del desarrollo. Se ha descrito una expresión desregulada de HLX en múltiples contextos de cáncer, en particular en neoplasias hematológicas, donde el control transcripcional alterado puede contribuir al crecimiento aberrante y al bloqueo de la diferenciación. En investigación básica, HLX1 sirve como un nodo para estudiar la regulación génica dependiente de homeobox y los circuitos transcripcionales en células humanas normales y transformadas.
HLX1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus HLX en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de HLX. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de HLX. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con HLX alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.