HLX1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-403700

Descripción general

HLX (homeobox similar a H2.0) codifica el factor de transcripción con homeodominio HLX1, un regulador de los programas de expresión génica del desarrollo y de la diferenciación específica de linaje. HLX1 influye en la maduración de células hematopoyéticas e inmunitarias al coordinar redes transcripcionales que gobiernan la proliferación, la supervivencia y las decisiones de destino celular, vinculándolo a vías que controlan la señalización sensible a citocinas y la regulación transcripcional aguas abajo. Se ha descrito una expresión desregulada de HLX en contextos relevantes para la biología de enfermedades hematológicas y asociadas al sistema inmune, lo que lo convierte en un objetivo útil para estudiar mecanismos de diferenciación aberrante y reprogramación transcripcional. Como proteína nuclear de unión al ADN, HLX1 también se utiliza en investigaciones sobre el control potenciador-promotor, la regulación dependiente de la cromatina y los circuitos de factores de transcripción del desarrollo.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO HLX1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen HLX en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del HLX junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de HLX tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína HLX1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en HLX para la investigación de la señalización de HLX1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de HLX críticos para la función de HLX1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de HLX para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido HLX1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido HLX1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus HLX. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR HLX1 (h) y el plásmido HDR HLX1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología HLX para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana HLX definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.