Partículas Lentivirales de Activación (m) Histone Deacetylase 6 (HDAC6): sc-420820-LAC

Hdac6 codifica la histona desacetilasa 6 (HDAC6), una desacetilasa predominantemente citoplasmática que regula la acetilación de sustratos no histónicos, incluidos la α-tubulina, HSP90 y la cortactina, influyendo así en la dinámica de los microtúbulos, la actividad de chaperonas y la remodelación de la actina. A través de estas funciones, HDAC6 coordina procesos clave como la autofagia y la eliminación de proteínas mal plegadas mediada por aggresomas, el tráfico intracelular y la señalización de respuesta al estrés. La actividad de HDAC6 se cruza con vías de proteostasis que implican control de calidad dependiente de ubiquitina y puede modular la señalización inflamatoria y los programas de motilidad celular. Las redes asociadas a HDAC6 desreguladas se han vinculado con modelos de neurodegeneración, fenotipos asociados al cáncer y patología inmunomediada, lo que respalda su amplia utilidad en estudios mecanísticos.

Las partículas de activación lentiviral Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (m) responden a esta necesidad al empaquetar el sistema completo de activación transcripcional del mediador de activación sinérgica (SAM) en partículas lentivirales de alto título listas para la transducción, lo que permite una regulación al alza eficiente de Hdac6 en una gama más amplia de tipos de células humanas.

Las partículas de activación lentiviral Histone Deacetylase 6 (HDAC6) (m) suministran todos los componentes funcionales del sistema mediador de activación sinérgica (SAM) a través de la transducción lentiviral. El sistema comprende tres preparaciones de partículas cotransducidas en las células diana: una que codifica dCas9 catalíticamente inactivo (mutaciones D10A y N863A) fusionado al dominio de transactivación VP64 con un gen de resistencia a la blasticidina; otra que codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1 con un gen de resistencia a la higromicina; y otra que codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 con un gen de resistencia a la puromicina. Tras la transducción lentiviral y la integración genómica de los casetes de expresión, los componentes del SAM se expresan de forma estable y se ensamblan en el locus diana dentro de la región promotora proximal, aguas arriba del sitio de inicio de la transcripción Hdac6, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma cooperativa para reclutar la maquinaria transcripcional endógena e impulsar la regulación al alza sostenida de la expresión endógena de Histone Deacetylase 6 (HDAC6). El uso de dCas9 inactivo frente a nucleasas evita la introducción de roturas de ADN de doble cadena y preserva el locus genómico nativo Hdac6 y la arquitectura reguladora.

El formato lentiviral ofrece varias ventajas prácticas: la integración genómica estable permite la activación hereditaria a lo largo de las divisiones celulares; las preparaciones de partículas de alto título eliminan la necesidad de producir el virus internamente; y la compatibilidad con tipos de células primarias, no divisibles y resistentes a la transfección amplía la accesibilidad experimental. La transducción exitosa puede confirmarse y enriquecerse mediante selección con triple antibiótico utilizando puromicina, higromicina y blasticidina.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.