Plasmide Double Nickase (h) Histone Deacetylase 11 (HDAC11): sc-402103-NIC

HDAC11 code l’histone désacétylase 11, une désacylase des lysines dépendante du Zn2+ qui module l’accessibilité de la chromatine et les programmes transcriptionnels en retirant des modifications acyles de substrats histoniques et non histoniques. En tant que seule HDAC de classe IV, HDAC11 fait le lien entre le contrôle épigénétique et les voies de signalisation immunitaires et métaboliques, influençant des processus tels que l’expression de gènes inflammatoires, la fonction des cellules présentatrices d’antigènes et la différenciation cellulaire. L’activité de HDAC11 a été associée à la régulation de réseaux de cytokines et de voies transcriptionnelles sensibles au stress, ce qui en fait un nœud pertinent dans l’étude des dérégulations immunitaires et du remodelage épigénétique oncogénique. Une expression ou une fonction altérée de HDAC11 est donc fréquemment étudiée dans des contextes tels que la biologie tumorale, la neuroinflammation et l’adaptation métabolique.

Histone Deacetylase 11 (HDAC11) Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus HDAC11 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de HDAC11. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de HDAC11. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.

Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de HDAC11.

Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.