Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Double Nickase Plasmid (h): sc-403221-NIC

HDAC10 kodiert für Histon-Deacetylase 10, eine zinkabhängige Histon-Deacetylase, die die Chromatinzugänglichkeit und Transkriptionsprogramme moduliert, indem sie Acetylgruppen von Histonen und anderen Proteinsubstraten entfernt. Als Deacetylase der Klasse II mit ausgeprägten zytoplasmatischen Funktionen wird HDAC10 mit der Regulation der Autophagie, DNA-Schadensantworten und der zellulären Anpassung an Stress in Verbindung gebracht und beeinflusst dadurch Signalwege, die Proliferation und Überleben steuern. Eine veränderte Expression oder Aktivität von HDAC10 wurde mit Änderungen des epigenetischen Zustands sowie mit metabolischen und immunbezogenen Signalnetzwerken assoziiert, die in verschiedenen Krankheitskontexten beobachtet werden, darunter die Krebsbiologie und neuroinflammatorische Prozesse. Diese Funktionen machen HDAC10 zu einem nützlichen Ziel, um die epigenetische Kontrolle der Genexpression und die daraus resultierenden Phänotypen in menschlichen Zellmodellen zu untersuchen.

Histone Deacetylase 10 (HDAC10) Das Double-Nickase-Plasmid (h) besteht aus einem aufeinander abgestimmten Plasmidpaar, das für die hochspezifische Bearbeitung des HDAC10-Lokus in human-Zelllinien entwickelt wurde. Jedes Plasmid exprimiert eine Cas9-D10A-Nickase und eine spezifische sgRNA, die auf entgegengesetzte DNA-Stränge innerhalb von HDAC10 abzielt. Wenn sie auf benachbarte Stellen auf entgegengesetzten DNA-Strängen gerichtet sind, erzeugen die beiden Nickasen versetzte Einzelstrang-Schnitte, die zusammen einen versetzten Doppelstrangbruch erzeugen, was eine koordinierte On-Target-Aktivität beider Guides erfordert. Der resultierende DNA-Bruch wird durch endogene zelluläre Reparaturwege behoben, meist durch nicht-homologe Endverknüpfung (NHEJ), was zu Insertionen oder Deletionen führt, die die HDAC10-Funktion stören. Durch die Notwendigkeit einer doppelten sgRNA-Bindung am Zielort erhöht der Doppel-Nick-Ansatz die Spezifität der Bearbeitung und bietet eine komplementäre CRISPR-Strategie für Anwendungen, bei denen eine zusätzliche Kontrolle über die Zielgenauigkeit gewünscht ist.

Um eine effiziente Identifizierung editierter Zellen zu unterstützen, kodiert ein Plasmid GFP zur fluoreszierenden Visualisierung transfizierter Populationen, während das Begleitplasmid ein Puromycin-Resistenzgen für die Antibiotika-Selektion trägt. Zusammen unterstützen diese Merkmale eine effiziente Anreicherung co-transfizierter Populationen und vereinfachen die Validierung von Klonen mit HDAC10-Störung.

Nur für Forschungszwecke. Nicht für diagnostische oder therapeutische Zwecke bestimmt.