Plásmido Doble Nickase (m) Histone Deacetylase 1 (HDAC1): sc-436647-NIC

El gen murino **Hdac1** codifica la desacetilasa de histonas 1 (HDAC1), una HDAC de clase I que elimina grupos acetilo de residuos de lisina en las colas de las histonas para favorecer la compactación de la cromatina y la represión transcripcional. HDAC1 actúa en complejos correpresores multiproteicos como Sin3, NuRD y CoREST, integrando señales que regulan la progresión del ciclo celular, la replicación y reparación del ADN, y programas de diferenciación específicos de linaje. Al coordinar el silenciamiento epigenético en promotores y potenciadores, HDAC1 ayuda a mantener la estabilidad del genoma y modula las respuestas celulares al estrés y a señales del desarrollo. La actividad desregulada de HDAC1 se asocia con frecuencia a programas transcripcionales aberrantes observados en diversos modelos relevantes para enfermedad, incluida la transformación oncogénica y fenotipos del neurodesarrollo.

Histone Deacetylase 1 (HDAC1) El plásmido de doble nicasa (m) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus Hdac1 en líneas celulares mouse. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de Hdac1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de Hdac1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con Hdac1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.