Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Plasmide Double Nickase (h) GRPR: sc-401637-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GRPR correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GRPR Double Nickase (h) et le plasmide GRPR Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GRPR. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
- Après transfection, l'efficacité de knockout de gène peut être évaluée par WB, IF ou IHC en utilisant l'anticorps: GRPR Antibody (D-1): sc-398549
Informations pour la commande
| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GRPR | sc-401637-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plasmide Double Nickase (h2) GRPR | sc-401637-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Le GRPR humain (récepteur du peptide libérateur de gastrine) est un récepteur couplé aux protéines G qui se lie à des ligands de la famille peptide libérateur de gastrine/neuromédine B afin d’activer une signalisation dépendante de la PLCβ, la mobilisation du calcium intracellulaire et des réponses en aval des voies MAPK/ERK et PI3K. L’activité du GRPR influence la communication entre cellules épithéliales et neuronales, en régulant des processus tels que la sécrétion, la contractilité du muscle lisse et la signalisation mitogène. Des altérations de l’expression ou de la signalisation du GRPR ont été rapportées dans de multiples contextes tumoraux et sont également pertinentes pour la biologie neuroendocrinienne, ce qui en fait un nœud utile pour étudier les programmes transcriptionnels pilotés par les GPCR, la désensibilisation/internalisation du récepteur et les réseaux de signalisation dépendants du calcium.
GRPR Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GRPR dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GRPR. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GRPR. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GRPR.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.