Date published: 2026-7-10

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GPR43慢病毒激活颗粒(h2): sc-401858-LAC-2

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说明书
  • 针对种属:human
  • 200 µl 高滴度即用型CRISPR/dCas9慢病毒激活粒子
  • GPR43 慢病毒激活颗粒(h2)是一种协同激活介质(SAM)转录激活系统,通过细胞慢病毒转导,特异高效地上调目的基因的表达
  • GPR43慢病毒激活颗粒(h2)包含以下SAM激活元素:一种是去活化的Cas9 (dCas9)核酸酶(D10A and N863A),它融合了转录活化域VP64;一种是MS2-p65-HSF1融合蛋白;一种是目标特定的20 nt向导RNA。它们还含有杀稻瘟菌素,潮霉素和嘌呤霉素抗性基因
  • 一经转导,形成的SAM复合物结合到转录起始位点上游大约200-250 nt的特定位点区域,为高效激活基因,招募转录因子
  • 由 GPR43 慢病毒激活质粒 (h2) 和 GPR43 慢病毒激活质粒 (h22) 编码的 gRNA 靶向 FFAR2 启动子的不同调控区域。其中一种或两种设计可能可用
  • 转染后,基因激活效率可以用抗体:GPR43 Antibody (3B3): sc-293202,通过WB、IF或IHC分析
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    GPR43慢病毒激活颗粒(h2)

    sc-401858-LAC-2
    200 µl
    $455.00

    人类FFAR2(GPR43)编码一种感知短链脂肪酸的G蛋白偶联受体,可被乙酸和丙酸激活,并通过与Gαi/o和Gαq偶联的通路调控细胞内信号传导,包括对cAMP水平、钙离子通量以及下游MAPK反应的调节;该受体在免疫细胞和上皮细胞等背景中高表达,能够塑造趋化、细胞因子程序及与屏障相关的炎症过程,从而将微生物发酵代谢产物与宿主免疫代谢调控联系起来;FFAR2信号失衡被认为与炎症性和代谢性疾病的发生发展有关,包括先天免疫激活异常以及脂肪组织相关的代谢稳态改变;对FFAR2进行基因编辑可支持开展配体—受体药理机制、GPCR信号偏向性、微生物组—宿主代谢串扰以及相关细胞模型中的功能基因组学研究。

    GPR43 慢病毒激活颗粒(h2)通过将完整的协同激活介导体(SAM)转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中,满足了这一需求,从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 FFAR2 表达。

    GPR43 慢病毒激活颗粒(h2)通过慢病毒转导递送协同激活介导体(SAM)系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂:一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9(D10A和N863A突变),并携带布拉西定抗性基因; 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂;以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA(与两个MS2 RNA适配体融合)并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后,SAM组分得以稳定表达,并在FFAR2转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处,VP64、p65和HSF1协同作用,招募内源性转录 machinery,从而驱动内源性GPR43表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂,并保留原生的 FFAR2 基因组位点和调控架构。

    慢病毒载体具有多项实用优势:稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活;高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要;且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性,扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选,以确认并富集成功的转导。

    仅供研究使用。不用于诊断或治疗。