Plasmide Double Nickase (h) GPR22: sc-418054-NIC
- Espèces cibles: human
- 20 µg d'ADN plasmidique purifié et prêt à transfecter; Jusqu'à 20 transfections
- Le Plasmide Double Nickase (h) GPR22 correspond à une paire de plasmides chacun codant la nucléase Cas9 mutante D10A et un ARN guide (gARN) cible de 20 nt specifique, élaboré pour le knockout optimal de l'expression d'un gène avec une plus grande spécificité que le plasmide KO CRISPR/Cas9 correspondant.
- Les séquences des paires d'ARNg sont décalées de 20 pb environ pour induire avec la Cas9 une double entaille spécifique de l'ADN génomique, qui imite un DSB
- L'un des plasmides de la paire contient un gène de résistance à la puromycine; l'autre plasmide de la paire contient un marqueur GFP pour confirmer visuellement la transfection
- Le plasmide GPR22 Double Nickase (h) et le plasmide GPR22 Double Nickase (h2) codent pour des paires distinctes de gRNA ciblant GPR22. Un ou les deux modèles peuvent être disponibles
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| Nom du produit | Ref. Catalogue | COND. | Prix HT | QTÉ | Favoris | |
Plasmide Double Nickase (h) GPR22 | sc-418054-NIC | 20 µg | $410.00 |
GPR22 code un récepteur couplé aux protéines G (RCPG/GPCR) orphelin, dont on prévoit qu’il régule la transduction du signal à la membrane plasmique via des protéines G hétérotrimériques et des voies de seconds messagers en aval telles que l’AMPc/PKA et la MAPK. Bien que son ligand endogène reste inconnu, l’expression de GPR22 a été associée à la modulation des réponses au stress cellulaire et de l’homéostasie métabolique, ce qui concorde avec les rôles plus généraux des RCPG dans le contrôle des programmes transcriptionnels, des flux ioniques et de la signalisation par kinases. Dans les tissus humains, des variations d’expression de GPR22 ont été rapportées dans des contextes cardiovasculaires et métaboliques, et ce récepteur a été étudié pour ses contributions potentielles à des phénotypes associés à l’hypertrophie et au remodelage. Ces caractéristiques font de GPR22 une cible utile pour des études mécanistiques de la biologie des RCPG, de l’architecture des voies de signalisation et des relations génotype‑phénotype dans des modèles cellulaires pertinents.
GPR22 Le plasmide double nickase (h) se compose d'une paire de plasmides appariés, conçus pour une édition hautement spécifique du locus GPR22 dans les lignées cellulaires human. Chaque plasmide exprime une nickase Cas9 D10A et un sgRNA distinct ciblant des brins d'ADN opposés au sein de GPR22. Lorsqu'elles sont dirigées vers des sites adjacents sur des brins d'ADN opposés, les deux nickases génèrent des cassures simple brin décalées qui, ensemble, produisent une cassure double brin décalée, nécessitant une activité coordonnée sur la cible de la part des deux guides. La cassure d'ADN qui en résulte est résolue par les voies de réparation cellulaires endogènes, le plus souvent par jonction non homologue (NHEJ), ce qui conduit à des insertions ou des délétions qui perturbent la fonction de GPR22. En nécessitant l'engagement de deux ARNsg au locus cible, l'approche par double nick améliore la spécificité de l'édition et offre une stratégie CRISPR complémentaire pour les applications où un contrôle supplémentaire de la précision du ciblage est souhaité.
Afin de faciliter l'identification efficace des cellules éditées, un plasmide code pour la GFP permettant la visualisation par fluorescence des populations transfectées, tandis que le plasmide compagnon porte un gène de résistance à la puromycine pour la sélection antibiotique. Ensemble, ces caractéristiques favorisent l'enrichissement efficace des populations co-transfectées et simplifient la validation des clones présentant une perturbation de GPR22.
Réservé à la recherche. N'est pas destiné à un usage diagnostique ou thérapeutique.