Glutathione Peroxidase 2/GPX2 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-406827

Descripción general

GPX2 codifica la glutatión peroxidasa 2, una enzima antioxidante dependiente de selenio que reduce el peróxido de hidrógeno y los hidroperóxidos lipídicos utilizando el glutatión como donador de electrones, limitando así el daño oxidativo y preservando la homeostasis redox. La actividad de GPX2 se integra con la detoxificación celular de peróxidos y el metabolismo del glutatión, modulando la señalización dependiente de ROS y protegiendo las membranas de la peroxidación lipídica. En tejidos humanos, GPX2 se asocia de manera destacada con la biología de la barrera epitelial y las respuestas al estrés, y su expresión alterada se ha vinculado con el estrés oxidativo impulsado por la inflamación y con programas de proliferación desregulados. Por lo tanto, la alteración de GPX2 puede afectar vías que controlan el equilibrio redox, la supervivencia celular ante desafíos oxidativos y respuestas transcripcionales dependientes del contexto frente a ROS.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Glutathione Peroxidase 2/GPX2 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen GPX2 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del GPX2 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de GPX2 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Glutathione Peroxidase 2/GPX2.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en GPX2 para la investigación de la señalización de Glutathione Peroxidase 2/GPX2, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de GPX2 críticos para la función de Glutathione Peroxidase 2/GPX2
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de GPX2 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Glutathione Peroxidase 2/GPX2 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus GPX2. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Glutathione Peroxidase 2/GPX2 (h) y el plásmido HDR Glutathione Peroxidase 2/GPX2 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología GPX2 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana GPX2 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.