Plásmido Doble Nickase (h) GABA_B R1: sc-401714-NIC

GABBR1 codifica la subunidad 1 del receptor humano GABA\_B (GABA\_B R1), un componente indispensable de los receptores acoplados a proteína G heterodiméricos que median la neurotransmisión inhibitoria lenta en el sistema nervioso central. Tras su activación, la señalización de GABA\_B se acopla a proteínas G\_i/o para inhibir la adenilil ciclasa, modular las vías de cAMP/PKA, regular la actividad de los canales de calcio y potasio, y suprimir la liberación de neurotransmisores en sitios pre- y postsinápticos. Esta vía influye en la excitabilidad neuronal, la plasticidad sináptica y las oscilaciones de red, vinculando a GABBR1 con mecanismos que moldean la función de los circuitos. Las alteraciones del tono inhibitorio gabaérgico y la desregulación de la señalización del receptor GABA\_B se han investigado en el contexto de fenotipos neurológicos y neuropsiquiátricos, lo que respalda el uso de modelos de perturbación de GABBR1 para estudios mecanísticos.

GABAB R1 El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus GABBR1 en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de GABBR1. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de GABBR1. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.

Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con GABBR1 alterado.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.