Plásmido Doble Nickase (h) FTβ: sc-403479-NIC
- Especies Diana: human
- 20 µg de plásmido de ADN purificado listo para la trasfección; suficiente para 20 transfecciones máximo
- El Plásmido Double Nickase (h)FTβ consisten en un par de plásmidos cada uno codificando una nucleasa Cas9 mutada D10A y una guia de ARN de 20 nucleótidos (gRNA) diseñados para una mayor especificidad que el homologo CRISPR/Cas9 KO
- Las secuencias de gRNA tienen una diferencia de unas 20 pb para permitir un corte doble mediado por Cas9 en el ADN que imita el doble corte
- Uno de los plásmidos contiene el gen de resistencia a puromicina para la selección y el otro el marcado GFP para confirmar visualmente la transfección
- El plásmido de doble nickasa FTβ (h) y el plásmido de doble nickasa FTβ (h2) codifican diseños distintos de pares de gRNA dirigidos a FNTB. Puede que esté disponible uno o ambos diseños
- Tras la transfección, la eficacia del knockout puede comprobarse mediante WB, IF ó IHC utilzando el anticuerpo: FTβ Anticuerpo (B-7): sc-46664
Información sobre pedidos
| Nombre del producto | Número de catálogo | UNIDAD | Precio | CANTIDAD | Favoritos | |
Plásmido Doble Nickase (h) FTβ | sc-403479-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Plásmido Doble Nickase (h2) FTβ | sc-403479-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
FNTB codifica la subunidad β de la farnesiltransferasa de proteínas (FTβ), una enzática clave de la vía de prenilación que cataliza la transferencia de un grupo farnesilo a proteínas con el motivo CAAX en el extremo C-terminal. Esta modificación lipídica favorece la asociación a membranas, la estabilidad proteica y el tráfico subcelular de diversas proteínas de señalización, influyendo así en vías que controlan la proliferación, la diferenciación y el transporte vesicular. La farnesilación dependiente de FTβ está estrechamente vinculada a redes de transducción de señales impulsadas por pequeñas GTPasas y a la regulación del citoesqueleto. La desregulación de la dinámica de la prenilación y la alteración de la dependencia de la actividad de la farnesiltransferasa se han asociado con contextos de señalización oncogénica y otros trastornos que implican complejos de señalización aberrantes localizados en membrana.
FTβ El plásmido de doble nicasa (h) consiste en un par de plásmidos emparejados diseñados para la edición de alta especificidad del locus FNTB en líneas celulares human. Cada plásmido expresa una nicasa Cas9 D10A y un ARN guía específico (sgRNA) dirigido a cadenas de ADN opuestas dentro de FNTB. Cuando se dirigen a sitios adyacentes en cadenas de ADN opuestas, las dos nicasas generan cortes en cadena simple desplazados que, juntos, producen una rotura de doble cadena escalonada, lo que requiere una actividad coordinada sobre el objetivo por parte de ambas guías. La rotura de ADN resultante se resuelve mediante vías de reparación celular endógenas, más comúnmente a través de la unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que da lugar a inserciones o deleciones que alteran la función de FNTB. Al requerir la participación de dos ARN guía en el locus diana, el enfoque de doble corte mejora la especificidad de la edición y proporciona una estrategia CRISPR complementaria para aplicaciones en las que se desea un control adicional sobre la precisión de la orientación.
Para facilitar la identificación eficiente de las células editadas, un plásmido codifica GFP para la visualización fluorescente de las poblaciones transfectadas, mientras que el plásmido complementario lleva un gen de resistencia a la puromicina para la selección con antibióticos. En conjunto, estas características facilitan el enriquecimiento eficiente de las poblaciones cotransfectadas y simplifican la validación de los clones con FNTB alterado.
Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.