Fos B Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400306

Descripción general

FOSB codifica Fos B, un factor de transcripción de respuesta inmediata del complejo AP-1 que forma dímeros con proteínas de la familia JUN para regular la expresión génica dependiente de estímulos. Fos B integra señales de las vías MAPK/ERK, calcio y AMPc para controlar programas vinculados a la proliferación, diferenciación y supervivencia celular, así como a la plasticidad sináptica. Su rápida inducción tras la exposición a factores de crecimiento, el estrés y la actividad neuronal lo convierte en un marcador y mediador útil de la transcripción dependiente de la actividad. La desregulación de la señalización FOSB/AP-1 se ha asociado con la transformación oncogénica y la invasión en múltiples contextos tisulares, así como con la remodelación transcripcional relacionada con trastornos neuropsiquiátricos y con la neurodegeneración.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Fos B (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen FOSB en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del FOSB junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de FOSB tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Fos B.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en FOSB para la investigación de la señalización de Fos B, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de FOSB críticos para la función de Fos B
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de FOSB para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Fos B CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Fos B CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus FOSB. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Fos B (h) y el plásmido HDR Fos B (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología FOSB para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana FOSB definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.