Plásmido CRISPR de Activación (h) Fos B: sc-400306-ACT

El gen humano **FOSB** codifica **Fos B**, un factor de transcripción bZIP de la familia **AP-1** que forma heterodímeros con proteínas **JUN** para regular programas de expresión génica dependientes de estímulos. Fos B se induce rápidamente por factores de crecimiento, citocinas y la actividad neuronal, conectando señales extracelulares con el control transcripcional de la proliferación, la diferenciación, las respuestas al estrés y la plasticidad sináptica. Su actividad se integra con las redes de **MAPK/ERK** y de genes de respuesta inmediata para moldear vías posteriores implicadas en la inflamación y la adaptación celular. La desregulación de la señalización de **FOSB** se ha asociado con fenotipos neuronales e inmunitarios alterados y se ha estudiado en el contexto de la remodelación transcripcional relacionada con el cáncer y de mecanismos de enfermedades neuropsiquiátricas.

Fos B El plásmido de activación CRISPR (h) proporciona un enfoque específico y no destructivo para regular al alza la expresión endógena de FOSB sin alterar la secuencia de ADN subyacente.

Fos B El plásmido de activación CRISPR (h) es un sistema mediador de activación sinérgica (SAM) de tres plásmidos diseñado para la regulación al alza transcripcional altamente eficiente y específica del locus FOSB en líneas celulares humanas. El sistema se basa en una Cas9 catalíticamente inactiva (dCas9) que porta dos mutaciones inactivadoras (D10A y N863A) que eliminan la actividad nucleasa al tiempo que conservan la unión al ADN. Esta dCas9 se fusiona con VP64, un potente activador transcripcional, y se coexpresa con un gen de resistencia a la blasticidina para la selección. El segundo plásmido codifica la proteína de fusión MS2-p65-HSF1, un complejo activador secundario que actúa en conjunto con dCas9-VP64, junto con un gen de resistencia a la higromicina. El tercer plásmido codifica un ARN guía (sgRNA) específico del objetivo de 20 nt fusionado a dos aptámeros de ARN MS2 que reclutan el complejo MS2-p65-HSF1 al sitio de activación, acompañado de un gen de resistencia a la puromicina. Los tres plásmidos se administran en una proporción de masa de 1:1:1 para una expresión equilibrada de todos los componentes del sistema.

Una vez ensamblado en el locus diana, el complejo SAM se une aproximadamente 200 pb aguas arriba del sitio de inicio transcripcional FOSB, donde VP64, p65 y HSF1 actúan de forma coordinada para reclutar la maquinaria transcripcional e impulsar la regulación al alza de la expresión endógena de Fos B. A diferencia de la Cas9 con actividad nucleasa, dCas9 no introduce roturas de doble cadena ni modifica la secuencia genómica, preservando el locus nativo FOSB y permitiendo el estudio de las respuestas transcripcionales dependientes de Fos B en el locus endógeno, lo que la convierte en una herramienta valiosa para estudios funcionales, la identificación de genes diana y la modelización de la restauración de la vía Fos B en células tumorales con expresión de FOSB silenciada o reducida.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.