Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Fibrillarin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-400741
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Fibrillarin O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico Fibrillarin, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Fibrillarin Anticorpo (G-8): sc-374022
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Fibrillarin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-400741 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
O FBL codifica a fibrilarina, uma metiltransferase nucleolar essencial que catalisa a metilação 2′-O da ribose do pré-rRNA no âmbito de complexos snoRNP do tipo box C/D, sustentando a biogénese ribossómica e a capacidade de tradução. A fibrilarina contribui para o processamento do pré-rRNA, a organização do nucléolo e a coordenação da modificação de RNA com o crescimento celular e as respostas ao stress. A homeostase nucleolar alterada e a produção de ribossomas são características recorrentes de patologias proliferativas e do neurodesenvolvimento, e a desregulação de FBL tem sido associada a alterações em programas de processamento de RNA e na aptidão celular. A fibrilarina é também um autoantigénio bem caracterizado em doenças autoimunes sistémicas, ligando a biologia de RNP nucleolares ao reconhecimento imunitário.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO Fibrillarin (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene FBL em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do FBL, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do FBL na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína Fibrillarin.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de FBL para a investigação da sinalização de Fibrillarin, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) FBL críticos para a função Fibrillarin
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos FBL para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo Fibrillarin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo Fibrillarin Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus FBL. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo Fibrillarin Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR Fibrillarin (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia FBL para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo FBL definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.