Exportin 6 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-404915

Descripción general

XPO6 codifica la exportina 6, un receptor de exportación nuclear dependiente de RanGTP que media el transporte selectivo de complejos profilina–actina desde el núcleo hacia el citoplasma. Al controlar la disponibilidad de actina nuclear, la exportina 6 influye en la remodelación de la cromatina dependiente de actina, la regulación transcripcional y la arquitectura nuclear vinculada al ciclo celular. Esta vía de tráfico nucleocitoplasmático se integra con redes más amplias de transporte Ran/importina–exportina que coordinan programas de expresión génica y respuestas al estrés. Las alteraciones en la dinámica de la actina y en la regulación del transporte nuclear en las que participa XPO6 se han estudiado en contextos relevantes para el comportamiento de células tumorales y otros trastornos caracterizados por desregulación del citoesqueleto y de la transcripción.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO Exportin 6 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen XPO6 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del XPO6 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de XPO6 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína Exportin 6.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en XPO6 para la investigación de la señalización de Exportin 6, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de XPO6 críticos para la función de Exportin 6
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de XPO6 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido Exportin 6 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido Exportin 6 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus XPO6. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR Exportin 6 (h) y el plásmido HDR Exportin 6 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología XPO6 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana XPO6 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.