Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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EMAP II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420161
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- EMAP II O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico EMAP II, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:EMAP II Anticorpo (A-4): sc-393228
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
EMAP II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420161 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Aimp1 codifica a EMAP II (polipeptídeo II ativador de monócitos endoteliais), uma proteína multifuncional mais conhecida como um fator do tipo citocina derivado do componente AIMP1 do complexo multissintetase de tRNA. A EMAP II participa de sinalização de estresse e inflamação, modulando a quimiotaxia de leucócitos, as respostas endoteliais e uma regulação mais ampla de processos da imunidade inata. Em modelos murinos, alterações na atividade de Aimp1/EMAP II têm sido associadas a vias que controlam apoptose, sinalização relacionada à angiogênese e remodelamento tecidual. A desregulação desses processos é relevante para estudos de inflamação crônica, biologia do microambiente tumoral–imune e mecanismos de disfunção vascular.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO EMAP II (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Aimp1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Aimp1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Aimp1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína EMAP II.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Aimp1 para a investigação da sinalização de EMAP II, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Aimp1 críticos para a função EMAP II
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Aimp1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo EMAP II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo EMAP II Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Aimp1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo EMAP II Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR EMAP II (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Aimp1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Aimp1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.