Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF4H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h): sc-411056
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4H O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (h) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF4H, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF4H Anticorpo (C-6): sc-515265
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) | sc-411056 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
EIF4H codifica o fator humano de iniciação da tradução eIF4H, uma proteína acessória que coopera com o eIF4A para estimular a atividade de helicase de RNA dependente de ATP e promover o escaneamento através de UTRs 5′ estruturadas durante a iniciação da tradução dependente de cap. Ao ajustar o recrutamento de ribossomos e a eficiência de tradução específica de cada mRNA, o eIF4H ajuda a moldar a produção do proteoma em resposta a sinais de crescimento e ao estresse celular, ligando a função de EIF4H à regulação de proliferação, diferenciação e programas de adaptação ao estresse. A desregulação de componentes da iniciação da tradução, incluindo o eIF4H, tem sido associada à expressão alterada de vias oncogênicas e de sobrevivência e é frequentemente investigada em contextos como biologia tumoral, neurobiologia e controle da tradução vírus–hospedeiro. Assim, a perturbação de EIF4H oferece um ponto de entrada útil para dissecar mecanismos de controle translacional e suas consequências a jusante na sinalização.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF4H (h) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene EIF4H em linhas celulares human. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do EIF4H, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do EIF4H na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF4H.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de EIF4H para a investigação da sinalização de eIF4H, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) EIF4H críticos para a função eIF4H
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos EIF4H para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF4H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h) e pelo eIF4H Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (h2) têm como alvo locais distintos dentro do locus EIF4H. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF4H Plasmídeo HDR (h) e o Plasmídeo HDR eIF4H (h2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia EIF4H para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo EIF4H definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.