Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (m): sc-431393-NIC
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4AIIIO plasmídeo de dupla Nickase (m) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF4AIII (m) e o Plasmídeo Double Nickase eIF4AIII (m2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para Eif4a3. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF4AIII Anticorpo (B-2): sc-365549
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (m) | sc-431393-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF4AIII Plasmídeo duplo de Nickase (m2) | sc-431393-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
Eif4a3 codifica a eIF4AIII, uma helicase de RNA do tipo DEAD-box que atua como componente central do complexo de junção de éxons (EJC), conectando o splicing do pré-mRNA a etapas posteriores de exportação, localização, vigilância e tradução do mRNA. A eIF4AIII participa da degradação de mRNA mediada por nonsense (NMD) ao estabilizar a deposição do EJC em transcritos submetidos a splicing e ao ajudar a definir códons de terminação prematuros. Por meio dessas funções de processamento de RNA, Eif4a3 influencia a integridade do transcriptoma e programas de proteostase que moldam o controle do ciclo celular, a diferenciação e a expressão gênica responsiva ao estresse. A desregulação do EJC e de fatores associados à NMD está ligada a fenótipos do desenvolvimento e neurobiológicos e é frequentemente explorada para estudar mecanismos de splicing aberrante e controle de qualidade de RNA em modelos relevantes para doenças.
eIF4AIII O Plasmídeo de Nickase Dupla (m) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus Eif4a3 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de Eif4a3. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função Eif4a3. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com Eif4a3 interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.