Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
Não são dados CRISPR: a imagem ilustra a qualidade do anticorpo para visualizar os resultados da experiência CRISPR.
eIF4AI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420146
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF4AI O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF4AI, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF4AI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420146 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Eif4a1 codifica, no camundongo, a helicase de RNA DEAD-box eIF4AI, um componente central do maquinário de iniciação da tradução eIF4F que desenrola 5′ UTRs estruturadas para permitir o escaneamento do ribossomo e o reconhecimento do códon de início. Por meio da remodelação dependente de ATP da estrutura secundária do mRNA, a eIF4AI sustenta a tradução dependente de cap e influencia a proteostase, a adaptação ao estresse e a progressão do ciclo celular. Sua atividade se integra ao controle da síntese proteica regulado por mTOR e pode moldar programas seletivos de tradução que afetam crescimento, metabolismo e diferenciação. Alterações na dinâmica de iniciação da tradução envolvendo helicases da família eIF4A têm sido associadas a sinalização oncogênica, fenótipos do neurodesenvolvimento e desregulação de respostas ao estresse, tornando Eif4a1 um ponto relevante para estudos mecanísticos de controle translacional.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF4AI (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Eif4a1 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Eif4a1, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Eif4a1 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF4AI.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Eif4a1 para a investigação da sinalização de eIF4AI, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Eif4a1 críticos para a função eIF4AI
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Eif4a1 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF4AI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo eIF4AI Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Eif4a1. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF4AI Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR eIF4AI (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Eif4a1 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Eif4a1 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.