Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
eIF3η Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400817-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF3ηO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase eIF3η (h) e o Plasmídeo Double Nickase eIF3η (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para EIF3B. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF3η Anticorpo (C-5): sc-137214
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF3η Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400817-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
eIF3η Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400817-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
EIF3B codifica a subunidade B do fator eucariótico de iniciação da tradução 3 (eIF3η), um componente central do complexo eIF3, formado por múltiplas subunidades, que atua como plataforma para fatores de iniciação e para a subunidade ribossomal 40S, promovendo o recrutamento do mRNA e o reconhecimento do códon de início. Por seu papel na iniciação da tradução dependente de cap, o eIF3η contribui para a proteostase, a progressão do ciclo celular e o controle translacional adaptativo durante o estresse celular. Alterações na função do complexo eIF3 têm sido associadas a programas desregulados de síntese proteica observados em fenótipos proliferativos e de resposta ao estresse, tornando o EIF3B um ponto útil para estudar a reprogramação translacional. Assim, a perturbação de EIF3B é relevante para pesquisas sobre sinalização de crescimento e mecanismos de controle da tradução, frequentemente remodelados em estados celulares associados a doenças.
eIF3η O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus EIF3B em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de EIF3B. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função EIF3B. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com EIF3B interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.