Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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eIF2Bδ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m): sc-420143
- alvos específicos: mouse
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- eIF2Bδ O Plasmídeo CRISPR/Cas9 Knockout (KO) (m) é um conjunto de plasmídeos, cada um codificando a nuclease Cas9 e um RNA guia (gRNA) de 20 nt específico para o alvo, concebido para uma eficiência máxima de knockout utilizando sequências derivadas da biblioteca GeCKO v2
- As sequências de gRNA direcionam a Cas9 para induzir quebras de cadeia dupla (DSBs) específicas do local no locus genómico eIF2Bδ, resultando no knockout do gene através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ)
- Os genes de resistência à puromicina e RFP são flanqueados por sítios LoxP, permitindo a remoção de marcadores de seleção através da recombinase Cre (Cre Vector: sc-418923) após o estabelecimento de linhas celulares knockout estáveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:eIF2Bδ Anticorpo (P-6): sc-9981
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
eIF2Bδ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) | sc-420143 | 20 µg | $397.00 |
Visão geral
Eif2b4 codifica a subunidade δ do eIF2B, o fator de troca de nucleótidos de guanina que reconverte eIF2-GDP em eIF2-GTP e, assim, controla a iniciação da tradução. Ao modular a disponibilidade do complexo ternário, o eIF2B integra sinais nutricionais e de stress no âmbito da resposta integrada ao stress e interseta-se com a regulação da síntese proteica dependente da fosforilação de eIF2α. A atividade do eIF2B influencia a proteostase, o crescimento celular e programas transcricionais adaptativos associados ao stress do RE (retículo endoplasmático) e ao stress oxidativo. Disfunções nas subunidades do eIF2B estão associadas a vias de leucodistrofia hipomielinizante, tornando o Eif2b4 um ponto relevante para estudar o controlo da tradução sensível ao stress em sistemas neuronais e gliais.
O Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO eIF2Bδ (m) é um conjunto de plasmídeos concebido para a interrupção direcionada do gene Eif2b4 em linhas celulares mouse. Cada plasmídeo coexpressa um RNA guia único (sgRNA) direcionado a um local distinto dentro do Eif2b4, juntamente com a nuclease Cas9 de Streptococcus pyogenes. Os plasmídeos também codificam GFP, permitindo a identificação fluorescente e o enriquecimento de células transfectadas com sucesso por microscopia de fluorescência ou citometria de fluxo.
O design multiguia aumenta a probabilidade de gerar inserções ou deleções (indels) que interrompem o quadro de leitura aberto do Eif2b4 na sequência da formação de quebras de cadeia dupla mediadas por Cas9. As quebras de ADN introduzidas pelo sistema CRISPR/Cas9 são reparadas através de vias endógenas de junção de extremidades não homólogas (NHEJ), resultando frequentemente em mutações de deslocamento de quadro que abolir a expressão da proteína eIF2Bδ.
Este sistema de knockout CRISPR permite a geração eficiente de modelos celulares com deficiência de Eif2b4 para a investigação da sinalização de eIF2Bδ, estudos de genómica funcional, investigação em biologia do cancro e avaliação de respostas terapêuticas em linhas celulares humanas.
Características principais
- sgRNAs direcionados para o(s) exão(ões) Eif2b4 críticos para a função eIF2Bδ
Coexpressão de SpCas9 e sgRNA a partir de um único plasmídeo para simplificar a administração
Repórter GFP para identificação de células transfectadas
Conjunto de plasmídeos direcionados para múltiplos locais genómicos Eif2b4 para melhorar a eficiência do knockout
Compatível com administração por transfecção
Variantes de Design
CRISPRs +/- HDRs
- Os gRNAs codificados pelo eIF2Bδ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m) e pelo eIF2Bδ Plasmídeo CRISPR/Cas9 KO (m2) têm como alvo locais distintos dentro do locus Eif2b4. Pode estar disponível um ou ambos os designs de alvo. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
As construções doadoras HDR codificadas pelo eIF2Bδ Plasmídeo HDR (m) e o Plasmídeo HDR eIF2Bδ (m2) contêm uma cassete de resistência à puromicina e um repórter RFP flanqueado por braços de homologia Eif2b4 para suportar a reparação dirigida por homologia em locais-alvo Eif2b4 definidos, correspondentes aos desenhos de KO CRISPR/Cas9. A disponibilidade do doador HDR pode variar. Consulte Produtos Relacionados para verificar a disponibilidade.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.