DSCR 1 Plásmido CRISPR/Cas9 KO (h): sc-402694

Descripción general

RCAN1 (DSCR1) codifica una proteína que interactúa con la calcineurina y actúa como regulador endógeno de la señalización dependiente de Ca2+ al modular la actividad fosfatasa de la calcineurina. A través de esta interacción, DSCR1 influye en programas transcripcionales impulsados por NFAT que gobiernan las respuestas al estrés, el crecimiento celular y la diferenciación, y se conecta con las vías de MAPK y del estrés oxidativo. La expresión de RCAN1 responde a estresores celulares y a la señalización por citocinas, lo que la vincula con el control dinámico de las salidas transcripcionales en múltiples tejidos. La actividad desregulada de RCAN1 se ha asociado con fenotipos del neurodesarrollo y con alteraciones en la señalización vascular e inmunitaria, aportando una base mecanística para estudiar desequilibrios de vías en contextos relevantes para la enfermedad.

El plásmido CRISPR/Cas9 KO DSCR 1 (h) es un conjunto de plásmidos diseñado para la interrupción dirigida del gen RCAN1 en líneas celulares human. Cada plásmido coexpresa un ARN guía único (sgRNA) dirigido a un sitio distinto dentro del RCAN1 junto con la nucleasa Cas9 de Streptococcus pyogenes. Los plásmidos también codifican GFP, lo que permite la identificación fluorescente y el enriquecimiento de las células transfectadas con éxito mediante microscopía de fluorescencia o citometría de flujo.

El diseño multiguía aumenta la probabilidad de generar inserciones o deleciones (indeles) que interrumpan el marco de lectura abierto de RCAN1 tras la formación de roturas de doble cadena mediadas por Cas9. Las roturas de ADN introducidas por el sistema CRISPR/Cas9 se reparan a través de vías endógenas de unión de extremos no homólogos (NHEJ), lo que con frecuencia da lugar a mutaciones de desplazamiento del marco de lectura que anulan la expresión de la proteína DSCR 1.

Este sistema de knockout CRISPR permite la generación eficiente de modelos celulares deficientes en RCAN1 para la investigación de la señalización de DSCR 1, estudios de genómica funcional, investigación en biología del cáncer y evaluación de respuestas terapéuticas en líneas celulares humanas.

Características principales

• sgRNA dirigidos a los exones de RCAN1 críticos para la función de DSCR 1
  Coexpresión de SpCas9 y sgRNA a partir de un único plásmido para simplificar la administración
  Reportero GFP para la identificación de células transfectadas
  Conjunto de plásmidos dirigidos a múltiples sitios genómicos de RCAN1 para mejorar la eficiencia del knockout
  Compatible con la administración mediante transfección

Variantes de diseño

CRISPRs +/- HDRs

• Los gRNA codificados por el plásmido DSCR 1 CRISPR/Cas9 KO (h) y el plásmido DSCR 1 CRISPR/Cas9 KO (h2) se dirigen a sitios distintos dentro del locus RCAN1. Puede estar disponible uno o ambos diseños de orientación. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.
  Las construcciones donantes HDR codificadas por el plásmido HDR DSCR 1 (h) y el plásmido HDR DSCR 1 (h2) contienen un casete de resistencia a la puromicina y un reportero RFP flanqueado por brazos de homología RCAN1 para facilitar la reparación dirigida por homología en sitios diana RCAN1 definidos que se corresponden con los diseños de KO de CRISPR/Cas9. La disponibilidad de los donantes HDR puede variar. Consulte «Productos relacionados» para conocer la disponibilidad.

Sólo para uso en investigación. No destinado a uso diagnóstico o terapéutico.