Not CRISPR data: the image illustrates antibody quality for visualizing CRISPR experiment results.
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Doublecortin Plasmídeo duplo de Nickase (h): sc-400033-NIC
- alvos específicos: human
- 20 µg de plasmídeo de DNA pronto para transfecção; Suficiente para até 20 transfecções
- Doublecortin/DCXO plasmídeo de dupla Nickase (h) consiste num par de plasmídeos cada um contem D10A com mutação na nuclease Cas9 nuclease e um alvo especifico de RNA guia com 20 na (gRNA), criado para nocautear a expressão genética com maior especificidade do que o seu correspondente CRISPR/Cas9 KO
- Sequencias pareadas de gRNA são de aproximadamente 20 bp para permitir que os cortes duplos no DNA genômico mediados pela Casp ocorram com especificidade , o que se assemelha ao corte pela DSB
- Cada plasmídeo pertencente ao par de plasmídeos contem um gene de resistência a puromicina para seleção; o outro plasmídeo do par contem um marcador de GFP para a visualização e confirmação da transfecção
- O Plasmídeo Double Nickase Doublecortin/DCX (h) e o Plasmídeo Double Nickase Doublecortin/DCX (h2) codificam designs distintos de pares de gRNA direcionados para DCX. Um ou ambos os desenhos podem estar disponíveis
- Após a transfecção, a eficácia do processo de nocaute genético por ser testada WB, IF ou IHC usando o anticorpo:Doublecortin/DCX Anticorpo (E-6): sc-271390
Informacoes sobre ordens
| Nome do Produto | Numero de Catalogo | UNID | Preco | Qde | FAVORITOS | |
Doublecortin Plasmídeo duplo de Nickase (h) | sc-400033-NIC | 20 µg | $410.00 | |||
Doublecortin Plasmídeo duplo de Nickase (h2) | sc-400033-NIC-2 | 20 µg | $410.00 |
DCX codifica a doublecortin, uma proteína associada a microtúbulos que se liga a eles e os estabiliza para regular a migração neuronal, o crescimento de neuritos e a formação das camadas corticais durante o desenvolvimento do cérebro. A doublecortin coordena a remodelação do citoesqueleto e o acoplamento entre o centrossomo e o núcleo, integrando-se à dinâmica dos microtúbulos que molda a polaridade celular e o movimento direcionado. A disfunção de DCX compromete a migração radial e o posicionamento neuronal, e variantes patogênicas estão associadas a malformações do neurodesenvolvimento, incluindo lisencefalia ligada ao X e heterotopia subcortical em banda. Como marcador de DCX e regulador funcional em neurônios imaturos, é amplamente utilizada para estudar mecanismos de neurogênese, regulação do citoesqueleto e montagem de circuitos durante o desenvolvimento.
Doublecortin/DCX O Plasmídeo de Nickase Dupla (h) consiste num par de plasmídeos combinados, concebidos para a edição de alta especificidade do locus DCX em linhas celulares human. Cada plasmídeo expressa uma nickase Cas9 D10A e um sgRNA distinto que tem como alvo cadeias de ADN opostas dentro de DCX. Quando direcionadas para locais adjacentes em cadeias de ADN opostas, as duas nickases geram cortes deslocados numa única cadeia que, em conjunto, produzem uma quebra escalonada de cadeia dupla, exigindo uma atividade coordenada no alvo por parte de ambas as guias. A quebra de ADN resultante é resolvida por vias de reparação celular endógenas, mais frequentemente através da junção de extremidades não homólogas (NHEJ), levando a inserções ou deleções que perturbam a função DCX. Ao exigir o envolvimento de dois sgRNA no locus alvo, a abordagem de dupla nickase aumenta a especificidade da edição e fornece uma estratégia CRISPR complementar para aplicações em que se deseja um controlo adicional sobre a precisão do direcionamento.
Para apoiar a identificação eficiente das células editadas, um plasmídeo codifica GFP para visualização fluorescente das populações transfectadas, enquanto o plasmídeo complementar transporta um gene de resistência à puromicina para seleção antibiótica. Em conjunto, estas características apoiam o enriquecimento eficiente das populações co-transfectadas e simplificam a validação dos clones com DCX interrompido.
Apenas para uso em investigação. Não se destina a uso diagnóstico ou terapêutico.