DNA pol γ慢病毒激活颗粒(m): sc-422341-LAC

小鼠 Polg 基因编码 DNA 聚合酶 γ（pol γ），这是线粒体 DNA 唯一的复制型聚合酶，支持 mtDNA 的复制、修复以及线粒体内基因组完整性的维持。DNA pol γ 与其辅助亚基协同作用，以确保高过程性合成与校对功能，从而将 Polg 活性与氧化磷酸化能力及线粒体生物发生联系起来。POLG 功能受损与 mtDNA 含量耗竭或多重缺失、呼吸链功能受损以及影响高能量需求组织的细胞应激反应相关。作为线粒体基因组稳定性的核心节点，Polg 被广泛用于研究连接核苷酸代谢、复制应激与线粒体功能障碍的通路，这些通路与神经退行性变、肌病以及衰老模型密切相关。

DNA pol γ 慢病毒激活颗粒（m）通过将完整的协同激活介导体（SAM）转录激活系统包装到可直接转导的高滴度慢病毒颗粒中，满足了这一需求，从而能够在更广泛的人类细胞类型中高效上调 Polg 表达。

DNA pol γ 慢病毒激活颗粒（m）通过慢病毒转导递送协同激活介导体（SAM）系统的所有功能组分。该系统包含三种共同转导至靶细胞的颗粒制剂：一种编码与VP64转激活域融合的无催化活性的dCas9（D10A和N863A突变），并携带布拉西定抗性基因； 一种编码MS2-p65-HSF1融合蛋白并携带潮霉素抗性基因的制剂；以及一种编码靶标特异性20 nt sgRNA（与两个MS2 RNA适配体融合）并携带嘌呤霉素抗性基因的制剂。经过慢病毒转导和表达盒的基因组整合后，SAM组分得以稳定表达，并在Polg转录起始位点上游的近端启动子区域内的靶位点组装。在此处，VP64、p65和HSF1协同作用，招募内源性转录 machinery，从而驱动内源性DNA pol γ表达的持续上调。使用无核酸酶活性的 dCas9 可避免引入双链 DNA 断裂，并保留原生的 Polg 基因组位点和调控架构。

慢病毒载体具有多项实用优势：稳定的基因组整合支持细胞分裂过程中的可遗传激活；高滴度颗粒制剂免去了内部病毒生产的需要；且与原代细胞、非增殖细胞及转染抗性细胞类型的兼容性，扩大了实验的可及性。可通过嘌呤霉素、潮霉素和布拉西定进行三重抗生素筛选，以确认并富集成功的转导。

仅供研究使用。不用于诊断或治疗。